Rezultatele obtinute in fiecare etapa 


          Faza 1/ 25.10.2006-20.11.2006
Obiectiv planificat: Prepararea si caracte­rizarea fizico-chimica si struc­turala a complecsilor de inclusziune ai ciclodextrinelor naturale si modificate cu sulconazol si estimarea activitatii antimicotice a conjugatelor ciclodextrina-medicament.
Descrierea activităţii: Raportul de cercetare prezinta sinteza prin liofilizare si caracterizarea spectrala, termogravimetrica si morfologica a complecsilor de incluziune medicament/ciclodextrina. Este prezentata sinteza a 4 complecsi de incluziune medicament/ciclodextrina, respectiv sulconazol cu α-, β-, γ-, hidroxipropil- β-CD cat si caracterizarea lor structurala prin H1-RMN, analiza termogravimetrica prin DSC si ATG, cat si morfologica prin metode de scanare microscopica in sisteme multiomponente. De mentionat faptul ca a fost luat in studiu un antimocotic din clasa azolilor, sulconazolul.

Rezultate obţinute:
-     studii, analize, documentari

  • structuri (4), metoda de sinteza liofilizarea
  • model de caracterizare morfologica prin SEM
  • model de caracterizare termogravimetrica, spectrala si morfologica
  • raport de cercetare
  • s-a elaborat  2 lucrari stiintifice
  • s-au sintetizat geluri fizice pe bază  de complecşi termosensibili PAV/borax în vederea folosirii ca matrici purtătoare de principii actives-au sintetizat 3 tipuri de sisteme complexe conţinând compuşi cu activitate antifungică
  • s-au sintetizat complecşi mixti PAV/borax/iod având caracteristici morfo-structurale diferite
  • stabilirea programei si a orarului cursului „ Complecsi de incluziune pentru sisteme cu eliberare controlata de principii active”
  • s-a elaborat structura cursului de instruire având tema “Stadiul actual al cunoasterii in   domeniul complecsilor de incluziune

          Studiile realizate pe complecsii de incluziune confirma includerea medicamentului in cavitatea ciclodextrinei cu efecte benefice asupra solubilitatii si stabilitatii medicamentului.

          Faza 2/: 21.11.2006-15.11.2007.
Obiectiv planificat: Sinteza si caracterizarea structurala a complecsilor de incluziune cu substante medicamentoase avand  actiune anti-HIV si antimicotica. Determinarea activitatii biologice ale conjugatelor cu activitate antimicotica.
Descrierea activităţii. Obţinerea unor medicamente cu calităţi îmbunătăţite reprezintă o preocupare continuă atât pentru cercetarea fundamentală cât şi pentru producătorii de medicamente. Una dintre căile de îmbunătăţire a calităţii medicamentelor, o reprezintă încapsularea substanţelor bioactive în ciclodextrine şi obţinerea de noi forme polimorfice. Incapsularea în ciclodextrine conferă proprietăţi noi medicamentelor : biodisponibilitate şi solubilitate mărită, eliberare treptată, mascare gust sau miros neplăcut. In cadrul etapei a II a “Determinarea activităţii biologice a conjugatelor cu activitate antimicotică”, cu termen de predare 1 nov.2007, Partenerului 2 USAMV Iaşi i-a revenit activitatea de testare a compuşilor cu activitate antimicotică.
Rezultate obţinute:
In cadrul acestei etape de execuţie, Partenerul 2 a realizat următoarele determinări:
-           Testarea toxicităţii (DL 50) compuşilor de incluziune pe animale de laborator;
-           Compararea toxicităţii intre compuşii de incluziune şi compuşii iniţiali;
-           Testarea activităţii antifungice in vitro pentru compuşii de incluziune şi compuşii iniţiali.


- Organizarea unui workshop cu tema : Medicaţia antifungică-de la concepţie la administrare organizat de USAMV Iaşi la data de 27.04.2007
- desfasurarea cursului „MANAGEMENTUL PROIECTELOR: CONCEPTE; METODE; INSTRUMENTE” in data de 19/09/2007 si in data de 20/09/2007 sustinut de domnul Conf. dr. ing. Romeo-Mihai CIOBANU, Catedra de Management, Universitatea Tehnica "Gh. Asachi" Iasi. Cursul este prevazut in planul de realizare al proiectului.
- desfasurarea cursului „LEGISLATIA ROMANA IN DOMENIUL PROTECTIEI PROPRIETATII INTELECTUALE” in data de 1 august 2007 sustinut de
Lector universitar, Doctor in drept international ANGELA BACIU, UNIVERSITATEA 'PETRE ANDREI' IASI. Cursul este prevazut in planul de realizare al proiectului.
- desfasurarea cursului „Stadiul actual al cunoasterii in domeniul compusilor de incluziune” organizat în colaborare cu Institutul „P.Poni”,  au participat masteranzi ai secţiei „Biomateriale polimerice” de la Facultatea de Inginerie Chimică şi Protecţia Mediului, doctoranzi din Universitatea Tehnică „Gh.Asachi”, doctoranzi şi tineri cercetători din Institutul „P.Poni”.  

          Faza 3/: 2008.
Obiective planificate
 * Prepararea si caracte¬rizarea fizico-chimica si struc¬turala a complecsilor de incluziune ai ciclodextrinei sulfonate cu medicamente antimicotice si anti-HIV.
* Determinarea activitatii biologice a conjugatelor cu activitate antimicotica.
* Estimarea activitatii biologice ale conjugatelor cu activitate anti-HIV.
* Organizarea unui workshop cu tema : Imbunatatirea calitatii medicatiei antifungice- complexarea cu ciclodextrine organizat de ICMPP Iaşi la data de 27.07.2008
* Organizarea de cursuri

  • “Modularea eliberarii principiilor active prin complexarea de tip gazda-oaspete” organizat in cadrul Institutului “Petru Poni”, la care au participat doctoranzi si tineri cercetatori din cadrul insitutului.

* Training in laboratoare de specialitate: instruire in metode hidrodinamice de caracterizare a complecsilor de incluziune a drd. Spulber Mariana la Institutul de Compusi Macromoleculari, St. Petersburg, Rusia in perioada 1-21 iunie 2008.
*  Teze de doctorat in tematica proiectului: 2 teze redactate (Mariana Spulber, N. Marangoci)

          Rezultate obtinute in etapa 2008
- S-au sintetizat prin liofilizare in mediu apos complecsi de incluziune ai sulconazolului (SULC), compus bioactiv cu actiune antimicotica cu diferite tipuri de ciclodextrine naturale si substituite
- Complecsii de incluziune au fost caracterizati fizico-chimic atat prin metode spectrale (H1-RMN), prin metode gravimetrice (DSC, ATG) si metode de scanare microscopica in sisteme multicomponente (Microscopia electronica de baleiaj- SEM).
- Solubilitatea 5 FC in solutii apoase in prezenta CD creste semnificativ pentru majoritatea sistemelor analizate

 

          Analiza rezultatelor obţinute în cadrul proiectului

 

Denumire produs

Stadiul de realizare

1. β-ciclodextrina sulfat

S-a realizat prima sulfonare regioselectiva a β-ciclodextrinei.

2. Sinteza benzoatului de 3-azido-3’-deoxitimidina (AZT)

Sinteza s-a realizat prin doua metode: 1) esterificarea AZT cu acid benzoic, 2) esterificarea AZT cu anhidrida benzoica .

Lista complecsilor de incluziune cu activitate anti-micotica:
ACD: α-ciclodextrina
BCD: β-ciclodextrina
GCD: γ-ciclodextrina
HP-CD: hidoxipropil-β-ciclodextrina
SCD: sulfat de β-ciclodextrina
MCD: Metil-β-ciclodextrina
AZT: 3-azido-3’-deoxytimidina
B-AZT: benzoat de AZT
FC: Flucitozina
SULC: Sulconazol
LIOF: liofilizat
COP: coprecipitat
SONIC-sonicat

Conjugatele cu activitate anti-micotica au fost preparate prin trei metode de sinteza: liofilizare, coprecipitare si sonicare.
Metode de analiza folosite:
SEM, RMN, raze X si s-au determinat constantele de stabilitate.

1.  ACD-SULC-LIOF

  1. BCD-SULC-LIOF
  2. GCD-SULC-LIOF
  3. MCD-SULC-LIOF
  4. SCD-SULC-LIOF
  5. HP-CD-SULC-LIOF
  6. ACD-FC-LIOF
  7. BCD-FC-LIOF
  8. GCD-FC-LIOF
  9. MCD-FC-LIOF
  10. SCD-FC-LIOF
  11. HP-CD-FC-LIOF
  12. ACD-SULC-COP
  13. BCD-SULC-COP
  14. GCD-SULC-COP
  15. MCD-SULC-COP
  16. SCD-SULC-COP
  17. HP-CD-SULC-COP
  18. ACD-FC-COP
  19. BCD-FC-COP
  20. GCD-FC-COP
  21. MCD-FC-COP
  22. SCD-FC-COP
  23. HP-CD-FC-COP
  24. ACD-SULC-SONIC
  25. BCD-SULC-SONIC
  26. GCD-SULC-SONIC
  27. MCD-SULC-SONIC
  28. SCD-SULC-SONIC
  29. HP-CD-SULC-SONIC
  30. ACD-FC-SONIC
  31. BCD-FC-SONIC
  32. GCD-FC-SONIC
  33. MCD-FC-SONIC
  34. SCD-FC-SONIC
  35. HP-CD-FC-SONIC

 

Complecsi de incluziune cu activitate anti-HIV
1. BCD- AZT
2. SCD-AZT
3. BCD-B-AZT
4. SCD-B-AZT

Complecsii de incluziune cu activitate anti-HIV s-au obtinut prin liofilizare

Sisteme polimerice  multicomponente  tip gel 

PAV   =   polialcool vinilic
TBNa  =  tetraborat de sodiu decahidrat
TMeTn = clorhidratul de N,N,N’,N’- tetrametil-tionină
HMeRA = hexametil-para-rosanilin clorura
SCZ =sulconazol = (1-[2-(4-Cloro-benzil-sulfanil)-2-(2,4-dicloro-fenil)-etil]-1H-imidazol)
Cy =β cilcodextrina
NST = nistatin =
BIF = Bifonazol
ClTZ =  Clotrimazol
ECZ = Econazolul
AMCZ = Azotat de Miconazole

 

1.Sisteme complexe PAV/TBNa

Geluri purtatoare de compusi biologic activi,  sensibile la mediu/lichide fiziologice (pH, temperatura, prezenta saruri)

2. Complex multicomponent
PAV/TBNa/ TMeTn
3. Complex multicomponent
PAV/TBNa/ HMeRA
4. Complex multicomponent
PAV/TBNa/ SCZ
5.Complex multicomponent
PAV/TBNa/ I2

Film xerogel cu potentiale aplicatii ca plasturi antimicotici

6.Complex multicomponent
PAV/TBNa/NST
7. Complex multicomponent
PAV/TBNa/ /NST

Geluri cu actiune antimicotica

8.Complex multicomponent
PAV/TBNa/Cy/NST

Film xerogel cu potentiale aplicatii ca antimicotic transdermic

9. Complex multicomponent
PAV/TBNa/Cy/BIF
10. Complex multicomponent
PAV/TBNa/Cy/ClTZ
11.Complex multicomponent
PAV/TBNa/Cy/ECZ
12. Complex multicomponent
PAV/TBNa/Cy/AMCZ

Geluri cu actiune antimicotica

Alte categorii de rezultate

 

S-a realizat prima sulfonare regioselectiva a β-ciclodextrinei.

 

S-a obtinut primul complex de incluziune a unei ciclodextrinei sulfonate cu 3-azido-3’-deoxitimidina (AZT)
 

Testele preliminare de activitate anti-HIV ale  complexului βCD(SO3Na)4 / AZT au relevat urmatoarele proprietati performante ale sistemului studiat in comparatie cu farmacologia  3-azido-3’-deoxitimidinei:
- diminuarea toxicitatii (CC50) a agentului anti-HIV AZT de 295,4/029 = 1018 ori;
- cresterea indeciului CC50/EC50 de 24616/363 = 67.8 ori.
- activitatea exprimata de indicele EC50 creste odata cu perioada de incubare si atinge dupa 10 ore o valoare egala cu cea a agentului AZT. Acest rezultat este  efectul eliberarii controlate a moleculei AZT din complex in tesuturile limfatice.                

Pentru prepararea compusilor cu activitate antimicotica si anti-HIV s-au utilizat metode neconventionale-nepoluante

Metode neconventionale -sonicare
-liofilizare

Determinarea DL 50 pentru BCD-FC si BCD-SULC

-DL50(BCD-FC) = 1250 mg/kg
-DL50 (BCD-SULC) = 1400 mg/kg.